本发明专利公开了一种鹌鹑性别鉴定用的两对PCR引物,包括一对微卫星引物和一对内参基因(β-actin)引物,本发明还提供了一种利用鹌鹑性别鉴定用PCR引物鉴定雏鹌鹑性别的方法,该方法为:以待测雏鹌鹑的血样基因组DNA为模板,采用鹌鹑性别鉴定用PCR引物进行PCR扩增,然后采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,判定雏鹌鹑性别。本发明利用仅存在于鹌鹑性染色体W染色体上的微卫星标记合理设计PCR引物,为防止出现假阳性,同时设计一对内参基因(β-actin)引物,与该微卫星引物同时使用,然后结合PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳技术鉴别个体雏鹌鹑的性别,具有操作简单方便,能够在出雏时进行性别鉴别、鉴别快速、结果准确等优点,避免了采用传统方法(在30日龄时根据体型外貌进行鉴别)耗时长、饲养成本高、易出错等缺点。